Estudo da correlação entre o receptor P2X7 e marcadores inflamatórios na progressão da nefropatia diabética em ratos

Abstract

O diabetes mellitus é uma doença crônica e metabólica caracterizada pela hiperglicemia, a qual ocorre devido à ausência da secreção ou por deficiência na ação da insulina. A hiperglicemia, entre outras ações, é responsável pelo aumento da síntese de ATP; este interage com o receptor P2X7, e sua ativação promove a abertura de poros na membrana plasmática das células, podendo liberar diversas substâncias como as citocinas e levar à morte celular. A presença de citocinas inflamatórias no DM pode ter relação com a expressão e ativação do P2X7. O objetivo deste trabalho foi estudar a correlação entre o receptor P2X7 e o perfil inflamatório em ratos diabéticos durante a progressão da nefropatia diabética. Para isso, ratos Wistar machos foram nefrectomizados unilateralmente, após uma semana metade dos animais foi submetida à administração de estreptozotocina (60 mg/kg) para indução do diabetes constituindo o grupo diabético (DM); a outra metade recebeu o veículo da droga, formando o grupo controle (CTL). No final das 5ª, 6ª, 7ª e 8ª semanas após a indução do DM, foi aferida a glicemia e a massa corporal dos animais, em seguida estes foram eutanasiados sob anestesia, e o rim remanescente foi coletado para realização do Western blot para análise do conteúdo proteico de IL6, IL-10 e P2X7. Os resultados foram descritos como média ±EP, com significância para p<0,05; a análise de variância realizada pelo teste T de Student não pareado, e as correlações foram realizadas pela análise de Spearman, utilizando o software GraphPad Prisma 5.0. Os níveis de glicemia dos animais DM estavam significantemente elevados nas 5ª, 6ª, 7ª e 8ª semanas de protocolo, assim como a massa corporal estava significantemente reduzida em todas as semanas. Em relação às citocinas, verificou-se que a IL-6 aumentou progressivamente até a 8ª semana, enquanto a IL-10 mostrou uma diminuição gradativa com o avanço da doença. O conteúdo proteico do receptor P2X7 encontrava-se aumentado no grupo DM, em todas as semanas analisadas. Os dados de correlação indicaram associação significante durante as 7ª e 8ª semanas de diabetes, sendo que entre o receptor P2X7 e a glicemia houve uma correlação forte e positiva; entre o receptor e a massa corporal houve uma correlação forte e negativa; e entre o receptor e a citocina IL-6 uma correlação moderada e positiva; sem demonstrar correlação significante para a citocina IL-10. Concluímos que há uma participação do P2X7 no quadro inflamatório da nefropatia diabética, uma vez que observamos a elevação e correlação desse receptor e da citocina IL-6, acompanhado da redução da citocina IL-10, sugere-se que o controle do estado inflamatório pode retardar e/ou amenizar os danos causados pelo receptor, tornando-o um potencial alvo terapêutico na doença.