Correlação entre o recptor P2X7 e os parâmetros de função renal, no estágio precoce do diabetes mellitus experimental

Abstract

Diabetes mellitus (DM) é uma doença crônica que ocorre quando há falha na produção de insulina ou quando esta não é utilizada de maneira eficiente pelo organismo. Dados da Organização Mundial da Saúde, de 2016, estimam que aproximadamente 422 milhões de pessoas foram diagnosticadas com DM, número que pode duplicar até 2040. A alta concentração de ATP, como visto no DM, é responsável pela ativação de receptores P2X7. O objetivo deste trabalho é correlacionar o conteúdo proteico de P2X7 com os parâmetros de função renal na fase precoce do DM. Ratos Wistar machos foram todos uninefrectomizados para acelerar o desenvolvimento da nefropatia diabética e em seguida foram distribuídos nos grupos controle e diabético em um protocolo de 8 semanas. O DM foi induzido pela administração de estreptozotocina (60 mg/kg, i.v.), sendo que os animais controle receberam apenas o veículo da droga ? tampão citrato. Os animais foram alocados em gaiolas metabólicas para coleta de urina e sangue em todas as semanas; estas amostras foram utilizadas para dosagens de ureia, creatinina, proteinúria, espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e óxido nítrico (NO). Os animais foram eutanasiados após as gaiolas metabólicas e o rim remanescente foi coletado para realização de dosagens bioquímicas e moleculares. Os resultados foram descritos como média ± erro padrão. Foi feito Teste T para dados paramétricos e para os dados não paramétricos foi realizado o teste de MannWhitney. A análise de variância foi feita por ANOVA de medidas repetidas, com significância definida para ambos por p<0,05. Foi observado aumento na ingesta deágua, ração, glicemia e proteinúria nos animais diabéticos em todas as semanas quando comparados com seus respectivos controles. A ureia urinária estava reduzida em todas as semanas no grupo diabético, enquanto que a ureia plasmática estava elevada da 1ª à 7ª semana neste mesmo grupo de animais. A creatinina urinária estava reduzida em todas as semanas nos animais diabéticos, assim como os níveis plasmáticos no momento basal, 1ª, 4ª, 6ª, e 8ª semanas. TBARS urinário estava elevado em todas as semanas nos animais diabéticos, enquanto que os níveis plasmáticos estavam elevados na 4ª e 8ª semana neste mesmo grupo. Os níveis de TBARS no córtex renal estavam elevados nos ratos diabéticos na 1ª, 2ª, e 8ª semanas. NO urinário estava reduzido em todas as semanas nos animais diabéticos, com significância na 5ª semana. Não houve alterações plasmáticas. O NO do córtex renal estava reduzido na 2ª semana, mas elevado na 4ª e 6ª semanas, comparando os animais diabéticos com seus controles. Os níveis proteicos de P2X7 se encontravam elevados na 8ª semana nos animais diabéticos. O delta destes níveis apontam para os maiores valores na 6ª e 8ª semana, quando comparados com a semana inicial de protocolo nos animais diabéticos. O receptor P2X7 apresentou uma forte correlação com os níveis de excreção urinária de NO nos animais diabéticos; isso nos permite inferir que este receptor pode ser a causa ou o efeito dos agentes que resultam na menor biodisponibilidade de NO.