Mecanismos moleculares envolvidos na síntese de prostaglandina E2, induzida por uma fosfolipase A2 ofídica, em pré-adipócitos murinos

Abstract

As peçonhas de serpentes da família Viperidae contêm teores elevados de enzimas lipolíticas, da família das fosfolipases A2 (FLA2s). A partir do veneno da serpente Bothrops asper, foi isolada a FLA2 MT-III, com potente atividade inflamatória e capacidade de ativar diferentes funções de células imunocompetentes. Esta enzima apresenta homologia estrutural e funcional com as FLA2s secretadas de mamíferos, do grupo IIA, encontradas em níveis elevados em pacientes com doenças de natureza inflamatória. Desse modo, a MT-III constitui uma ferramenta científica útil para o esclarecimento de processos fisiopatológicos associados à inflamação. A obesidade é uma doença metabólica, de natureza inflamatória, cuja incidência aumentou drasticamente nas últimas décadas, representando um fator de risco para a perda da saúde na sociedade contemporânea. Foi demonstrado que as FLA2s, do grupo IIA, encontram-se em níveis elevados no soro de pacientes obesos e no tecido adiposo inflamado, sugerindo um papel para este grupo de enzimas no desencadeamento e/ou desenvolvimento da obesidade. No entanto, até o presente, as ações destas enzimas, em pré-adipócitos, não estão esclarecidas. É conhecido que a PGE2 exerce efeitos antilipolíticos em adipócitos e acarreta acúmulo de lipídios nestas células, contribuindo para a diferenciação de pré-adipócitos em adipocitos maduros. Desse modo, este estudo investigou a capacidade da MT-III induzir a biossíntese de PGE2 e os mecanismos envolvidos neste efeito, com foco: i) na participação da ciclooxigenase-1 (COX-1) e -2 (COX-2) e dos receptores de PGE2 (EP1-EP4), ii) na expressão proteica da COX-1 e COX-2, iii) do receptor EP4 e iv) da prostaglandina E sintase -1 microssomal (PGESm-1). A MT-III induziu um aumento significativo da libertação de PGE2 desde a 1ª até a 12ª hora de incubação. O tratamento prévio dos pré-adipócitos com os inibidores da COX-1 ou COX-2 ou com o antagonista do receptor EP4 reduziu, significativamente, a liberação de PGE2 induzida pela MT-III. Além disso, a MT-III induziu um aumento significativo da expressão proteica de COX-2 na 6ª e 12ª hora de incubação e da mPGES-1 já na 1ª hora de incubação. Assim, este estudo demostrou que a MT-III é capaz de ativar diretamente os pré-adipócitos para a produção de PGE2 dependente da COX-1, COX-2 e do receptor EP4. Ainda, o aumento dos níveis proteicos da COX-2 e da PGESm-1 deve contribuir para a síntese de PGE2, induzida pela MT-III. Neste sentido, os pré-adipócitos são células alvo para as FLA2 secretadas, do grupo IIA, responsáveis pela biossíntese da PGE2, um importante mediador implicado no desencadeamento e desenvolvimento da obesidade.